因此定量检测HK2的含量，在骨巨细胞瘤经过过表达、沉默后的绝对数量，是检测HK2在骨巨细胞瘤发展过程中作用的一个定量证据。

WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。

经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分……

原理听起来颇为复杂，但其实真正要操作的时候，主要的步骤主要是以下几步。

试剂准备，也就是让蛋白质跑的跑道，需要聚丙烯酰胺凝胶电泳来提供。

然后是参赛的运动员，是把肿瘤细胞裂解之后，使得内部的蛋白质充分释放，然后制作了标准曲线。

制作标准曲线之后，就可以让自己处理的细胞产生的‘运动员’开始上赛道了。

紧接着是电泳、转模、免疫反应、显影等等一系列后，通过特殊的抗体和试剂，就能够显示目标蛋白的胶片。

将胶片进行扫描或拍照，用凝胶图象处理系统分析目标带的分子量和净光密度值……

这个过程很复杂，也相对漫长，更需要耐心。

不过，方子业反正已经下了门诊，来到实验室里，就一步一步地按部就班来做。且旁边还有洛听竹帮点小忙。

最后呈现出结果后，洛听竹欣喜异常：“方师兄，你今天这个条带显示很清楚欸，上一次范师兄跑出来的是哑铃状的。”

说完，她偏头看向方子业的成片，条带清晰、没有杂带、背景干净！

“呈哑铃状一般配置胶有问题，另外还有一种可能是样品中含有太多杂质，没有离心下来，然后杂质沉积在孔的中间，蛋白自然被推挤到两边。”

“配好胶，不合格的坚决不用，不要铤而走险。”方子业仔细想了一下原理，如此给洛听竹解释。

“那如果有条带拖尾呢？”洛听竹想了一下，又问了一个问题，应该是她跟着别人做的时候，看到过这样的情况。